幻灯二1

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)【ChP-2015】-醋酸醋杆菌-Heinz小体染色液(耐尔蓝法)

使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,SYBR Green染料因其高灵敏度和广泛的适用性而被广泛使用。然而,某些qPCR仪器(如某些型号的ABI仪器)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了SYBR Green的高效性和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。然而,并非所有qPCR仪器都需要高浓度的ROX。某些仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为了满足这些仪器的需求而设计的。 产品特点 优化的反应体系:SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及低浓度的ROX参考染料。

该产品预混了高浓度的ROX参考染料,适用于需要高浓度ROX校准的qPCR仪器,能够有效校正孔间荧光

T7 Endonuclease I(T7EI)是一种来源于T7噬菌体的核酸内切酶,能够特异性识别并切割DNA中的错配碱基对、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。这种酶在基因编辑领域,尤其是CRISPR-Cas9技术中,被广泛用于检测基因突变和编辑效率。 功能与特性 错配识别:T7EI能够识别DNA中的不完全配对碱基对,并在错配位点的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。 高特异性:该酶对特定DNA结构具有高度特异性,能够有效区分野生型和突变型DNA。 应用广泛:除了用于基因编辑效果的检测,T7EI还可用于分解四方向交叉DNA、检测或切割异源双链DNA、随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。 在CRISPR基因编辑中的应用 在CRISPR-Cas9基因编辑中,T7EI常用于检测目标基因是否成功引入突变。具体步骤如下: PCR扩增:分别以野生型和突变型DNA为模板,扩增包含突变位点的DNA片段。 变性与退火:将PCR产物变性后退火,形成异源双链DNA。 酶切反应:加入T7EI,在37℃下反应15-30分钟,通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。

因此,该缓冲液不仅适用于常规的DNA电泳,还特别适合用于终止酶促反应后的样品分析。

磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具,结合了经典的SDS碱裂解法和磁珠吸附技术,能够从大肠杆菌中快速、高效地提取高质量的质粒DNA。工作原理该试剂盒利用磁珠表面修饰的官能团,在高盐条件下特异性吸附质粒DNA,而杂质如蛋白质、盐离子等则通过洗涤液被去除。当条件改变时,质粒DNA从磁珠表面洗脱下来,从而实现快速分离和纯化。产品特点高效提取:从2 mL过夜培养的菌液(OD600 = 2.0)中可获得超过15 μg的高拷贝质粒DNA。操作简便:无需多次离心,整个提取过程可在1小时内完成,适合高通量操作。纯度高:提取的质粒纯度高,OD260/OD280比值一般为1.8-1.9,OD260/OD230比值大于2.0,可直接用于下游实验。自动化兼容:可与自动化核酸提取仪配合使用,实现完全自动化操作。 应用场景提取的质粒DNA可用于多种下游应用,包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等分子生物学实验。使用方法菌液处理:取适量菌液离心,弃上清后用裂解液悬浮细菌沉淀。裂解与吸附:加入裂解液和中和液,裂解细胞后加入磁珠,吸附质粒DNA。

在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。

2×miRNA去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专为miRNA电泳设计的试剂,能够有效变性核酸并提供清晰的电泳示踪效果,广泛应用于miRNA的分析和检测。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:去离子甲酰胺(Formamide):高浓度的甲酰胺能够有效变性核酸,消除其二级结构,确保miRNA在电泳过程中保持单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,帮助观察电泳的进程。EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸降解。使用方法样品混合:将miRNA样品与2×去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液按1:1比例混合。变性处理:混合后的样品在70℃加热5-10分钟,然后立即置于冰上冷却。电泳上样:将处理后的样品加入尿素-PAGE胶或甲醛变性琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×miRNA去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于miRNA的变性电泳,适用于尿素-PAGE胶和甲醛变性琼脂糖凝胶电泳。它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。

溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料,能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。

phi29 DNA Polymerase 是一种来源于 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,经过基因工程改造后,具有卓越的链置换和持续合成能力。它能够在等温条件下高效扩增DNA,生成长达70 kb的DNA片段。 特性与优势 高持续合成能力:phi29 DNA Polymerase 可以连续合成超过70 kb的DNA片段,无需从模板上解离。 高保真性:具有3′→5′外切酶校正活性,保真性比Taq DNA Polymerase高100倍。 链置换活性:能够高效置换DNA链,适合滚环扩增(RCA)和多重置换扩增(MDA)。 温和反应条件:反应温度通常为37-42℃,适合等温扩增。 应用场景 全基因组扩增(WGA):用于单细胞测序、病原微生物检测和宏基因组研究。 滚环扩增(RCA):生成周期性DNA纳米模板,适用于测序模板制备。 多重置换扩增(MDA):用于无偏扩增全基因组。 高GC含量模板扩增:在NGS测序中,能够提升高GC含量和复杂模板的扩增效率。 使用方法 储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。 反应条件:37-42℃孵育1-3小时,65℃加热10分钟失活。

Hot-Start Taq Master Mix采用了独特的热启动技术,确保Taq酶在低温下无活性

碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)是一种10倍浓缩的碱性DNA电泳缓冲液,主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成,呈强碱性。它广泛应用于碱性琼脂糖凝胶电泳实验中。产品特性成分:主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成。保存条件:室温保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。包装:通常以500 mL包装提供。使用方法稀释:使用无菌蒸馏水或去离子水将10×缓冲液稀释至1×工作液。制备琼脂糖凝胶:在三角烧瓶或玻璃瓶中加入准确量的琼脂糖粉和定量的水。加热使琼脂糖完全溶解,注意搅拌防止烧焦。冷却至55°C后,加入0.1倍体积的10×碱性凝胶电泳缓冲液,迅速灌制凝胶。电泳操作:将稀释后的1×缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加入样品后开始电泳,建议使用小于3.5 V/cm的电压。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。废弃物处理:使用后的废弃物应按照相关法律法规进行处理。

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