鸭疫里默氏杆菌-马克思克鲁维酵母-巴氏醋杆菌SHMCCD73651

Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 高保真性，快速扩展

T4 RNA连接酶2截短型（突变型）是一种经过基因工程改造的酶，通过引入特定的氨基酸突变（如R55K和K227Q），在保持高效连接活性的同时，显著降低了RNA的非特异性连接问题。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'羟基末端，无需ATP参与反应。 特点 高效连接活性：能够高效连接预腺苷化的单链DNA或RNA。 低背景连接：突变型酶减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。 无核酸酶污染：经过严格测试，确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。 热稳定性高：某些突变体在较高温度（如45℃和50℃）下仍保持较高的连接活性。 应用 T4 RNA连接酶2截短型（突变型）广泛应用于以下领域： 小RNA文库构建：用于二代测序（NGS）中的miRNA文库构建。 cDNA文库构建：将单链腺苷化引物连接至小RNA上。 链特异性cDNA文库构建：用于合成链特异性的cDNA文库。 使用方法 反应条件：在1×反应缓冲液中，25℃温育。 灭活条件：65℃加热20分钟。

该试剂盒采用一步法RT-qPCR技术，将逆转录和定量PCR反应集成在同一管中完成。

T4 RNA连接酶2截短型（T4 RNA Ligase 2, Truncated）是一种经过基因工程改造的酶，仅包含T4 RNA连接酶2的N端249个氨基酸残基。它能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'羟基末端。与全长的T4 RNA连接酶2不同，截短型酶不需要ATP来发挥活性，但需要预腺苷化的底物。 特点 特异性连接：只能利用5'端预腺苷化的单链DNA或RNA作为3'端接头，大大降低了连接反应的背景。 无需ATP：连接反应不依赖ATP，减少了非特异性连接产物的生成。 高纯度和稳定性：蛋白纯度超过99%，酶活性高，稳定性好。 应用 T4 RNA连接酶2截短型广泛应用于以下领域： 小RNA文库构建：在二代测序（NGS）中，用于miRNA文库构建中RNA的3'端接头连接。 cDNA文库构建：将单链腺苷化引物连接至小RNA上，用于cDNA克隆文库构建。 链特异性cDNA文库构建：将单链腺苷化引物连接至RNA上，用于链特异性cDNA文库构建。

Hot-Start Taq Master Mix 是一款专为高特异性、高灵敏度PCR反应设计

在分子生物学实验中，DNA凝胶电泳是一种常用的技术，用于分离和分析DNA片段。而6×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。 6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液，主要用于DNA凝胶电泳。它含有甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF等成分。其中，甘油可以增加样品的密度，使样品沉入凝胶加样孔中，防止样品漂浮；EDTA则用于螯合金属离子，防止DNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂，分别指示电泳的进程，帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。 使用6×DNA Loading Buffer时，通常按照1:5（Loading Buffer:DNA样品）的比例混合。例如，对于5μL的DNA样品，加入1μL的6×Loading Buffer，混匀后即可加样。这种缓冲液适用于多种浓度的琼脂糖凝胶，溴酚蓝在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶中的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。

SYBR Green I的诱变性明显低于EB，但仍需谨慎操作，避免直接接触皮肤。

DNA Marker VI是一种即用型的DNA分子量标准，广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中，用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成，条带大小分别为250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7000 bp和10000 bp。其中，2500 bp条带的浓度较高（约100 ng/5 µL），显示为加亮带，便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计：已预混1×Loading Buffer，可直接取2-5 µL进行电泳，使用方便。清晰的电泳条带：条带大小准确，带型清晰，稳定性好。适用范围：适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量：根据加样孔的宽度，取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL；如果加样孔较宽，可适当增加上样量。电泳条件： 凝胶浓度：建议使用1.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压：4-10 V/cm，电泳时间20-30分钟。染色与观察：电泳结束后，使用溴化乙锭（EB）或其他DNA染料染色，在紫外灯下观察条带。保存条件短期保存：4℃可保存6个月。长期保存：-20℃可保存至少2年。

其中，2500 bp条带的浓度较高（约100 ng/5 µL），显示为加亮带，便于在电泳后快速定位。

T4 RNA连接酶1（T4 RNA Ligase 1）是一种ATP依赖的酶，能够催化单链RNA、单链DNA或单核苷酸分子间或分子内5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。这种酶在RNA分子间的连接效率最高，其次为DNA与RNA之间的连接，而DNA分子间的连接效率最低。 工作原理 T4 RNA连接酶1的催化过程包括三个步骤： 酶与ATP反应，生成酶-AMP中间产物并释放焦磷酸。 AMP从中间产物转移到核酸的5'磷酸末端，形成腺苷酰化核酸中间产物。 另一核酸的3'羟基进攻腺苷酰化核酸中间产物的5'磷酸末端，形成3'-5'磷酸二酯键并释放AMP。 产品特点 高纯度与稳定性：蛋白纯度超过99%，酶活性高，稳定性好。 无核酸酶污染：经过DEPC处理，确保无RNase、DNase和蛋白酶污染。 适用范围广：可用于RNA和RNA之间的连接、RNA和单核苷酸之间的连接（用于3'末端标记）、RNA和DNA之间的连接，以及DNA的环化连接。 应用场景 miRNA检测：通过将miRNA首尾相连形成circRNA，结合RT-qPCR技术，提高检测灵敏度。

dNTP/dUTP Mixture 与尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG）联合使用可有效降解含dU的假阳性

微球菌核酸酶（Micrococcal Nuclease，MNase）是一种来源于金黄色葡萄球菌的核酸内切酶，具有广泛的生物技术应用价值。它能够在pH 7-10和Ca²⁺存在的条件下，降解单链、双链、线状和环状等多种形式的DNA和RNA，产生3'磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸。 在染色质免疫沉淀实验（ChIP）中，MNase被广泛用于染色质片段化。它能够特异性地消化核小体间连接区域的裸露DNA，而核小体核心颗粒中的DNA因受组蛋白保护而抵抗酶解，从而完整保留与目标蛋白结合的DNA片段。这种方法比传统的超声波片段化更具特异性，且温和，能显著提升实验分辨率。此外，MNase在核小体定位研究中也发挥重要作用，通过MNase-seq技术，研究人员可以绘制多种生物的核小体图谱，揭示核小体组织的特点及其在基因表达调控中的作用。 MNase还被用于降解蛋白制剂中的核酸，以减少核酸污染。在基因组测序领域，MNase能够快速切割DNA，生成适合测序的片段，提高测序效率。此外，MNase在抗菌领域也有应用，例如通过设计特定的寡核苷酸序列，利用MNase的酶解特性，实现抗生素在感染部位的响应性释放。

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