解糖假苍白杆菌-绿针假单胞菌橙色亚种-海面假单胞菌SHMCCD52690
它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。
MOPS电泳缓冲粉剂(1×)是一种专为核酸电泳设计的缓冲液,广泛应用于RNA和DNA的琼脂糖凝胶电泳实验中。MOPS(3-吗啉丙磺酸)是一种两性离子缓冲剂,具有良好的缓冲能力和稳定性,特别适用于中性pH条件下的核酸分离。产品特性成分:主要由MOPS、乙酸钠和EDTA组成。缓冲范围:pKa值为7.2,有效缓冲范围为pH 6.5-7.9。稳定性高:室温保存,有效期长达1年。即用型设计:粉剂形式,使用时只需用去离子水或双蒸水溶解。使用方法配制1×工作液:取一包MOPS电泳缓冲粉剂,倒入洁净的烧杯中。加入约800 mL去离子水或双蒸水,搅拌溶解。定容至1000 mL,混匀后即可使用。电泳操作:将配制好的1×MOPS缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。保存与注意事项保存条件:室温避光保存,未开封的产品有效期为1年。
在琼脂糖凝胶电泳中,GoldenView 与核酸结合后能产生强烈的荧光信号,其灵敏度与溴化乙锭相当
在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心手段,而dATP(脱氧腺苷三磷酸)作为DNA合成的基本原料之一,是PCR反应不可或缺的重要组成部分。 dATP Solution (100 mM)是一种高浓度的脱氧腺苷三磷酸溶液,专门用于PCR反应和其他需要DNA合成的实验。dATP是DNA合成过程中的四种脱氧核苷三磷酸(dNTPs)之一,它在DNA聚合酶的催化下,通过与模板DNA上的腺嘌呤(A)碱基配对,被嵌入到新合成的DNA链中。这种高浓度的dATP溶液能够为PCR反应提供充足的原料,确保DNA扩增的高效进行。 在PCR反应中,dATP的浓度对反应的效率和特异性有着重要影响。过高或过低的浓度都可能导致反应效率降低或非特异性产物的增加。因此,使用高纯度、高浓度的dATP溶液能够确保反应条件的优化,提高PCR的成功率和准确性。dATP Solution (100 mM)通常与其他三种dNTPs(dTTP、dCTP、dGTP)一起使用,以形成完整的dNTPs混合液,为DNA聚合酶提供所有必要的原料。
Hot-Start Taq Master Mix采用了独特的热启动技术,确保Taq酶在低温下无活性
phi29 DNA Polymerase 是一种源自 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,具有极高的过程性(processivity)和链置换活性,能够在等温条件下高效扩增DNA。这种酶还具有3'→5'外切酶(校对)活性,能够确保DNA合成的高保真性。特性与优势 高过程性:phi29 DNA Polymerase 可以合成超过70 kb的长DNA片段,无需辅助蛋白。链置换活性:强大的链置换能力使其能够在等温条件下高效扩增DNA。高保真性:3'→5'外切酶活性能够实时校正错误,确保DNA复制的高准确性。等温扩增:无需复杂的温度循环,适合快速、高效的DNA扩增。应用场景phi29 DNA Polymerase 广泛应用于多种分子生物学实验:滚环扩增(RCA):用于生成周期性DNA纳米模板,适合检测低丰度核酸。多重置换扩增(MDA):一种等温扩增技术,能够在恒定温度下进行全基因组扩增。全基因组扩增(WGA):用于从微量DNA样本中扩增全基因组,适用于单细胞测序。DNA模板制备:可用于测序的高质量DNA模板制备。
将 4S Green 10000× 储液稀释至 3× 染色液,将凝胶浸泡其中,室温振荡染色 30 分
T7 Endonuclease I(T7EI)是一种来源于T7噬菌体的核酸内切酶,能够特异性识别并切割DNA中的错配碱基对、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。这种酶在基因编辑领域,尤其是CRISPR-Cas9技术中,被广泛用于检测基因突变和编辑效率。 功能与特性 错配识别:T7EI能够识别DNA中的不完全配对碱基对,并在错配位点的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。 高特异性:该酶对特定DNA结构具有高度特异性,能够有效区分野生型和突变型DNA。 应用广泛:除了用于基因编辑效果的检测,T7EI还可用于分解四方向交叉DNA、检测或切割异源双链DNA、随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。 在CRISPR基因编辑中的应用 在CRISPR-Cas9基因编辑中,T7EI常用于检测目标基因是否成功引入突变。具体步骤如下: PCR扩增:分别以野生型和突变型DNA为模板,扩增包含突变位点的DNA片段。 变性与退火:将PCR产物变性后退火,形成异源双链DNA。 酶切反应:加入T7EI,在37℃下反应15-30分钟,通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。
由于UDG在高温下仍保留部分活性,建议在反应结束后添加尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯
SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。
25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液是一种用于核酸电泳的辅助试剂,能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,确保样品能够沉入凝胶加样孔。EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。应用场景25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液广泛应用于核酸的琼脂糖凝胶电泳实验中。它适用于检测 DNA 和 RNA 的片段大小、纯度以及分离效果。使用方法在使用前,需将 25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液稀释至所需浓度(如 6× 或 5×),然后与核酸样品按比例混合(通常为 1:1)。混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中进行电泳。储存条件该缓冲液应保存在室温下,避免光照和污染。25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液凭借其高效的样品沉降能力和清晰的示踪效果,已成为核酸电泳实验中不可或缺的工具,为科研人员提供了便捷和可靠的实验支持。
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