具核梭杆菌多形亚种-西藏盐红菌-氧化胺黄色杆菌
与T4 DNA连接酶不同,它需要NAD⁺作为辅酶,而不是ATP。
DNA Marker V是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为200 bp、400 bp、700 bp、1000 bp、1500 bp和2000 bp。其中,1000 bp条带的浓度较高(100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。
尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。
牛痘DNA拓扑异构酶I(Vaccinia DNA Topoisomerase I)是一种来源于牛痘病毒的I型拓扑异构酶,通过基因重组技术制备和纯化。它能够特异性识别双链DNA中的5'-(C/T)CCTT-3'序列,并在该序列的最后一个T和其之后的磷酸二酯键处切割DNA。切割后,酶与DNA的3'末端形成共价复合物,随后可利用DNA的5'羟基重新连接,释放酶并完成修复。 功能与应用 牛痘DNA拓扑异构酶I具有解旋超螺旋DNA的能力,可将超螺旋DNA转化为松弛的双链环状DNA,便于后续的酶切等操作。此外,它还可用于DNA连接,无需ATP或DNA连接酶即可完成。这使得它在TOPO克隆中表现出色,能够在5分钟内高效连接DNA片段,无需传统连接酶。它还被广泛应用于NGS建库中的接头连接。 实验操作 在实验中,牛痘DNA拓扑异构酶I通常在37℃下孵育,反应体系中需包含特定的反应缓冲液。该酶的最佳反应温度为37℃,且可通过80℃加热20分钟使其失活。由于其高效性和特异性,它已成为分子生物学实验中不可或缺的工具酶。
优化了反应缓冲体系,能够在短时间内完成高效扩增。其快速热启动Taq酶的扩增效率比普通Taq酶更高
蛋白A-微球菌核酸酶(Protein A-MNase,简称pA-MNase)是一种融合蛋白,由Protein A和微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)组成。它兼具Protein A的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性,广泛应用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。 特性与优势 高活性:pA-MNase具有高效的核酸内切酶活性,能够在短时间内将DNA降解为单核苷酸和寡核苷酸。 抗体结合能力:Protein A能够特异性结合免疫球蛋白的Fc区,使得pA-MNase可以被引导至目标蛋白所在的染色质区域。 低细胞需求量:适用于低至50个细胞的实验,尤其适合早期胚胎、干细胞和肿瘤等研究领域。 操作简便:实验流程简单,从细胞到二代测序文库的转化仅需1天。 应用场景 pA-MNase主要用于CUT&RUN(Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)技术,这是一种替代传统ChIP-Seq的新技术,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。
酶-AMP复合物识别DNA末端的5'-磷酸和3'-羟基,将AMP转移到DNA的5'-磷酸末端。
RNA/DNA/蛋白抽提试剂盒是一种能够从同一生物样本中同时提取高质量RNA、DNA和蛋白质的工具,广泛应用于分子生物学研究。它特别适用于珍贵样本的处理,能够在短时间内完成提取过程,且操作简单、高效。 工作原理 该试剂盒基于特殊裂解液的多组分分离原理。样本在裂解液中裂解后,通过离心分层,RNA存在于上层水相中,DNA和蛋白质则分别位于中间层和有机相。通过异丙醇沉淀和洗涤步骤,可分别获得高纯度的RNA、DNA和蛋白质。 优势 高效性:操作简单,提取过程不到1小时即可完成。 高纯度:提取的RNA无蛋白和DNA污染,DNA分子量高(≥20kb),蛋白质适用于多种分析。 适用范围广:适用于多种样本类型,包括细胞、组织、植物、微生物等。 无需有毒试剂:无需使用苯酚、氯仿等有毒物质,操作更安全。 应用场景 提取的RNA可用于RT-PCR、cDNA合成、基因表达分析等;DNA可用于PCR、Southern blot、基因组分析等;蛋白质可用于SDS-PAGE、Western blot等。这种试剂盒特别适合小量或珍贵样本的处理,能够最大化回收核酸和蛋白质。
Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)广泛应用于基因克隆、基因表达分析
CTP(胞苷三磷酸)是一种重要的核苷酸,广泛应用于分子生物学和生物化学实验中。100 mM CTP溶液(无核酸酶)是一种高纯度、无污染的试剂,适用于多种实验需求。 产品特点 高纯度:纯度≥99%,经过HPLC验证。 无核酸酶污染:经测试不含DNase、RNase、磷酸酶和蛋白酶,确保RNA和DNA的完整性。 稳定性高:在pH 7.3-7.5的条件下,CTP溶液极为稳定,可在-20℃保存长达2年。 用途广泛:适用于体外转录、RNA合成与扩增、siRNA合成等。 应用场景 体外转录:用于SP6、T3和T7 RNA聚合酶的反应,生成高质量的RNA。 RNA合成与扩增:提供能量支持,确保反应顺利进行。 siRNA合成:用于合成小干扰RNA,用于基因沉默。 使用注意事项 避免反复冻融:反复冻融会降低CTP的效率。 低温操作:使用时需在冰上操作,并在使用后立即放回-20℃保存。 防止污染:实验过程中需戴一次性手套,避免RNase污染。 100 mM CTP溶液(无核酸酶)凭借其高纯度、无污染和稳定性,已成为分子生物学实验中的重要试剂,特别适合需要高纯度和高效率的实验。
CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)是一种常用的细胞系,它具有稳定的生长特性和良好的基因表达能力。
在生物化学和分子生物学研究中,碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,AP)是一种极为重要的工具酶,广泛应用于DNA和RNA的去磷酸化处理,以及蛋白质的修饰研究。它以其高效、特异性强的特点,成为实验室中不可或缺的“去磷酸化专家”。 碱性磷酸酶的功能 碱性磷酸酶是一种能够催化多种磷酸酯水解的酶,其主要功能是去除核酸和蛋白质末端的磷酸基团。在DNA和RNA的处理中,碱性磷酸酶常用于去除5'末端的磷酸基团,从而防止DNA或RNA片段的自身连接或与载体的非特异性连接。这种处理对于构建重组DNA分子、制备线性DNA模板以及研究核酸的末端结构等实验至关重要。 广泛的应用 碱性磷酸酶在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在DNA克隆实验中,它被用于去除DNA片段的5'磷酸基团,防止片段的自身环化,从而提高克隆效率。在RNA研究中,碱性磷酸酶可以用于去除RNA末端的磷酸基团,帮助研究RNA的加工和修饰过程。此外,碱性磷酸酶还被用于蛋白质的去磷酸化研究,帮助科学家了解蛋白质的修饰状态和功能调控。
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