幻灯二1

广岛链霉菌SHMCCD60198=ATCC19845=BCRC13306=CBS951.69=DSM40436=ISP5436=JCM4511=NBRC13079=NRRLB-12369-球黑孢霉SHMCCD65071-栖藻海杆状菌

在分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性。

在分子生物学实验中,DNA合成是许多技术的核心,而dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)作为一种特殊的试剂,为DNA合成提供了更多可能性。这种混合液结合了四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脱氧尿苷三磷酸(dUTP),为PCR反应和其他DNA合成实验提供了多功能的支持。 dNTP/dUTP Mixture的独特优势 dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)是一种精心设计的混合液,其中每种dNTP的浓度为2.5 mM,而dUTP的浓度为5 mM。这种独特的配方使其在多种实验中表现出色: PCR反应中的应用:在传统的PCR反应中,dNTPs是DNA合成的基本原料。然而,dUTP的加入为PCR反应提供了额外的功能。例如,某些PCR反应需要引入dUTP来标记DNA,或者在后续实验中利用尿嘧啶糖基化酶(UNG)去除dU,从而实现PCR产物的特异性降解。这种混合液能够满足这些特殊需求,同时保持反应的高效性和特异性。

6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。

Bsu DNA Polymerase (Large Fragment) 是一种经过基因工程改造的酶,来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的DNA聚合酶I。通过删除其5′→3′核酸外切酶结构域,保留了5′→3′聚合酶活性,同时去除了3′→5′和5′→3′核酸外切酶活性。特性与优势 链置换活性:该酶具有强大的链置换能力,能够在等温条件下高效扩增DNA。 高活性:在25℃时仍保留50%的DNA聚合酶活性,是相同温度下Klenow片段(3′→5′ exo-)活力的两倍。温和反应条件:最佳反应温度为37℃,适合在较低温度下进行等温扩增。高纯度:不含DNA内切酶、外切酶和核糖核酸酶,确保反应的特异性和可靠性。应用场景Bsu DNA Polymerase (Large Fragment) 广泛应用于以下领域:重组酶聚合酶扩增(RPA):常用于等温扩增,适合快速、灵敏的病原体检测。DNA合成:可用于cDNA第二条链的合成、随机引物法标记以及单个dA的加尾。链置换反应:在需要置换DNA链的实验中表现出色。

在琼脂糖凝胶电泳中,GoldenView 与核酸结合后能产生强烈的荧光信号,其灵敏度与溴化乙锭相当

在分子生物学研究中,长片段DNA扩增是许多实验的关键步骤,但传统PCR方法在扩增较长片段时常常面临效率低、特异性差等问题。Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye)的出现,为这一难题提供了高效的解决方案。 Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系。它以Ultra-Long DNA Polymerase为核心,这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。 该Master Mix的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。实验人员可以根据需要选择是否添加染料,或者直接用于下游应用,如克隆、测序或无染料的凝胶电泳分析。

建议使用2.0%-2.5%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。

在生命科学领域,Taq DNA Polymerase犹如一颗璀璨的明珠,闪耀着独特的光芒。它是一种耐热的DNA聚合酶,最初是从一种嗜热细菌——栖热水生菌(Thermus aquaticus)中分离出来的。这种细菌生活在高温的温泉环境中,而Taq酶也因此具备了在高温下稳定工作的能力,这使得它在分子生物学实验中扮演了不可或缺的角色。 Taq DNA Polymerase的主要功能是催化DNA的合成。在聚合酶链式反应(PCR)中,Taq酶的作用尤为关键。PCR是一种用于快速扩增特定DNA片段的技术,它通过反复的变性、退火和延伸三个步骤来实现DNA的指数级扩增。在变性阶段,DNA双链被高温分离成单链;退火阶段,引物与模板DNA结合;而在延伸阶段,Taq酶便大显身手。它能够以单链DNA为模板,从引物的3'端开始,按照碱基互补配对原则,将一个个脱氧核苷酸添加到新链上,从而合成与模板互补的DNA链。由于Taq酶在高温下仍能保持活性,这使得PCR反应可以在较高的温度下进行,大大提高了反应的特异性和效率。

更值得一提的是,该试剂中加入了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)成分。

核酸内切酶VIII(Endonuclease VIII,Endo VIII)是一种具有N-糖基化酶和AP-裂解酶活性的DNA损伤修复酶,广泛应用于基因损伤修复研究。其截短体则是通过基因工程改造,删除部分氨基酸序列而获得的变体,通常用于特定的研究目的,如提高酶的稳定性或特异性。 功能与特性 N-糖基化酶活性:识别并切除双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生脱嘌呤(AP)位点。 AP-裂解酶活性:在AP位点的3'和5'端切割磷酸二酯键,产生具有3'和5'磷酸的碱基缺口。 高纯度与稳定性:核酸内切酶VIII截短体通过重组表达获得,纯度高,无核酸外切酶、核酸内切酶和RNase残留。 热失活:75℃孵育10分钟可使酶失活。 应用场景 DNA损伤修复研究:用于模拟和修复DNA损伤,特别是在氧化损伤研究中。 单细胞凝胶电泳(彗星试验):评估细胞内和体外的氧化DNA损伤。 NGS建库:在二代测序中,特异性切除含AP位点的模板链,实现双端测序。 酶法合成DNA:释放DNA链,用于合成特定的DNA结构。

热敏UDG在分子诊断和PCR实验中表现出色,尤其适用于需要严格控制污染的实验环境

λ核酸外切酶(Lambda Exonuclease)是一种来源于λ噬菌体的核酸外切酶,能够特异性地作用于双链DNA,沿5′→3′方向逐步去除5′端的单核苷酸。这种酶在分子生物学实验中具有广泛的应用。 工作原理 λ核酸外切酶的最适底物是5′端磷酸化的双链DNA。它能够高效地从5′端逐步降解双链DNA,生成单链DNA或单核苷酸。该酶对单链DNA和非磷酸化的双链DNA底物的降解效率较低,分别只有磷酸化双链DNA的1%和5%。此外,λ核酸外切酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。 应用场景 单链DNA制备:通过降解双链DNA的一条链,λ核酸外切酶可用于制备单链DNA。例如,在PCR产物中,使用5′端磷酸化的引物,可以通过λ核酸外切酶特异性降解其中一条链,从而获得单链DNA。 DNA末端修饰:在某些克隆实验中,λ核酸外切酶可用于去除DNA片段的5′端核苷酸,以实现特定的末端修饰。 基因编辑:在基因编辑技术中,λ核酸外切酶可用于处理线性化质粒,以提高同源重组的效率。 DNA损伤研究:λ核酸外切酶可用于研究DNA损伤和修复机制,通过降解损伤的DNA片段来模拟细胞内的DNA修复过程。

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