幻灯二1

栎假丝酵母SHMCCD53490-海蛹弧菌SHMCCD73048=ATCC33895-毒曲霉

它主要作用于具有黏性末端的DNA片段,但连接平末端的效率较低。

phi29 DNA Polymerase 是一种源自 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,具有极高的过程性(processivity)和链置换活性,能够在等温条件下高效扩增DNA。这种酶还具有3'→5'外切酶(校对)活性,能够确保DNA合成的高保真性。特性与优势 高过程性:phi29 DNA Polymerase 可以合成超过70 kb的长DNA片段,无需辅助蛋白。链置换活性:强大的链置换能力使其能够在等温条件下高效扩增DNA。高保真性:3'→5'外切酶活性能够实时校正错误,确保DNA复制的高准确性。等温扩增:无需复杂的温度循环,适合快速、高效的DNA扩增。应用场景phi29 DNA Polymerase 广泛应用于多种分子生物学实验:滚环扩增(RCA):用于生成周期性DNA纳米模板,适合检测低丰度核酸。多重置换扩增(MDA):一种等温扩增技术,能够在恒定温度下进行全基因组扩增。全基因组扩增(WGA):用于从微量DNA样本中扩增全基因组,适用于单细胞测序。DNA模板制备:可用于测序的高质量DNA模板制备。

耐热核糖核酸酶H能够在高温下高效地完成这一任务,避免了RNA模板在高温条件下的降解问题。

2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。 使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。

6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是核酸电泳实验中的重要工具,其高效、稳定且操作简便的特性。

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确的荧光信号检测是实验成功的关键。50× ROX Reference Dye作为一种常用的被动参考染料,为qPCR实验提供了重要的校准功能,确保了荧光信号的准确性和稳定性。 ROX Reference Dye的作用机制 ROX染料是一种被动参考荧光染料,其主要作用是校正qPCR反应中的非特异性荧光背景和孔间荧光信号的差异。在qPCR实验中,荧光信号的强度可能会受到多种因素的影响,如仪器的荧光检测系统的波动、反应体系的差异以及孔间位置的差异等。ROX染料通过提供一个稳定的荧光背景,帮助校正这些非特异性信号,从而提高定量结果的准确性和重复性。 50× ROX Reference Dye的应用 荧光定量PCR(qPCR):在qPCR实验中,ROX染料通常以一定比例添加到反应体系中。它不会参与PCR反应,但会提供一个稳定的荧光背景,用于校正仪器检测到的荧光信号。通过校正,可以更准确地反映目标基因的扩增情况,从而提高定量结果的可靠性。 多重qPCR:在多重qPCR实验中,ROX染料的作用尤为重要。

在分子生物学研究中,RNase R也具有重要的应用价值。

λ DNA HindIII是一种经典的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII Marker由8条双链DNA条带组成,片段大小分别为125 bp、231 bp、564 bp、6557 bp、9416 bp13589 bp、20270 bp和23130 bp。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。

这种试剂的独特之处在于其2×浓度的配方设计,使得实验操作更加便捷高效。

Benzonase核酸酶残留检测试剂盒是一种用于检测生物制品中Benzonase核酸酶残留量的高灵敏度工具。该试剂盒基于荧光法或ELISA原理,能够快速、准确地检测样品中核酸酶的残留量,对于生物制品的质量控制至关重要。 产品特点 高灵敏度:能够检测到低至0.002 U(约0.003 ng)的Benzonase核酸酶残留。 适用范围广:不仅可以检测Benzonase核酸酶,还可检测其他多种核酸酶,如DNase I、T4 DNA聚合酶、T5外切酶等。 检测速度快:采用一步法检测,全程仅需约10-20分钟。 操作简便:无需特殊仪器,常规实验室操作即可完成。 检测原理 试剂盒利用荧光共振能量转移(FRET)技术,通过特定的DNA寡核苷酸探针进行检测。探针一端带有荧光基团,另一端带有淬灭基团。当探针被Benzonase切割后,荧光信号增强,从而实现对核酸酶活性的灵敏检测。 使用方法 试剂准备:将所有试剂组分及待测样本恢复至室温。 标准曲线设置:将Benzonase标准品稀释至不同浓度梯度,加入96孔板中。 检测体系设置:依次加入试剂盒各组分及样品,建议每个样品设置平行孔或复孔。

在分子生物学实验中,核酸电泳是检测核酸片段大小和纯度的关键技术之一。

T4 RNA连接酶1(T4 RNA Ligase 1)是一种ATP依赖的酶,能够催化单链RNA、单链DNA或单核苷酸分子间或分子内5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。这种酶在RNA分子间的连接效率最高,其次为DNA与RNA之间的连接,而DNA分子间的连接效率最低。 工作原理 T4 RNA连接酶1的催化过程包括三个步骤: 酶与ATP反应,生成酶-AMP中间产物并释放焦磷酸。 AMP从中间产物转移到核酸的5'磷酸末端,形成腺苷酰化核酸中间产物。 另一核酸的3'羟基进攻腺苷酰化核酸中间产物的5'磷酸末端,形成3'-5'磷酸二酯键并释放AMP。 产品特点 高纯度与稳定性:蛋白纯度超过99%,酶活性高,稳定性好。 无核酸酶污染:经过DEPC处理,确保无RNase、DNase和蛋白酶污染。 适用范围广:可用于RNA和RNA之间的连接、RNA和单核苷酸之间的连接(用于3'末端标记)、RNA和DNA之间的连接,以及DNA的环化连接。 应用场景 miRNA检测:通过将miRNA首尾相连形成circRNA,结合RT-qPCR技术,提高检测灵敏度。

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