白布勒担孢酵母SHMCCD56866-00-北京奥托氏菌
胶染法(前染):在制备琼脂糖凝胶时,按 1:10000 的比例加入 4S GelRed 染料
BPTE电泳缓冲液(1×, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由PIPES、TRIS、EDTA等成分组成,经过0.1% DEPC处理,确保无RNase污染。产品特性无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。即用型设计:1×浓度,无需稀释,直接使用。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。pH值稳定:最终pH值约为6.5,适合RNA的稳定迁移。使用方法准备凝胶:根据实验需求,制备琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。加入缓冲液:将BPTE电泳缓冲液(1×, RNase free)加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。 电泳条件:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间根据RNA片段大小调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如Goldview或EB)染色,在紫外灯下观察RNA条带。
脱氧腺苷三磷酸(dATP)是DNA合成中的关键核苷酸之一,广泛应用于分子生物学的多种实验中即用型溶液
Tris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的高浓度缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性成分:主要由900 mM Tris-磷酸、20 mM EDTA和DEPC处理水组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TPE工作液含有90 mM Tris-磷酸和2 mM EDTA,pH值约为8.0。 无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TPE缓冲液用DEPC处理水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TPE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察RNA条带。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。 避免RNase污染:使用时需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。
dNTP/dUTP Mixture 与尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)联合使用可有效降解含dU的假阳性
DNA Marker V是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为200 bp、400 bp、700 bp、1000 bp、1500 bp和2000 bp。其中,1000 bp条带的浓度较高(100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。
将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确的荧光信号检测是实验成功的关键。50× ROX Reference Dye作为一种常用的被动参考染料,为qPCR实验提供了重要的校准功能,确保了荧光信号的准确性和稳定性。 ROX Reference Dye的作用机制 ROX染料是一种被动参考荧光染料,其主要作用是校正qPCR反应中的非特异性荧光背景和孔间荧光信号的差异。在qPCR实验中,荧光信号的强度可能会受到多种因素的影响,如仪器的荧光检测系统的波动、反应体系的差异以及孔间位置的差异等。ROX染料通过提供一个稳定的荧光背景,帮助校正这些非特异性信号,从而提高定量结果的准确性和重复性。 50× ROX Reference Dye的应用 荧光定量PCR(qPCR):在qPCR实验中,ROX染料通常以一定比例添加到反应体系中。它不会参与PCR反应,但会提供一个稳定的荧光背景,用于校正仪器检测到的荧光信号。通过校正,可以更准确地反映目标基因的扩增情况,从而提高定量结果的可靠性。 多重qPCR:在多重qPCR实验中,ROX染料的作用尤为重要。
对于小于500 bp的DNA片段,检测信号可能较弱,建议使用其他染料如SYBR Green I。
3×甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专门用于核酸电泳的辅助试剂,特别适用于RNA样品的变性电泳。它能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分该缓冲液的主要成分包括:90% 甲酰胺(Formamide):用于变性核酸,使其保持单链状态。0.075% 二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 0.075% 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。30 mM EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。变性处理:将混合后的样品在 70℃加热变性 5-15 分钟,然后立即置于冰上冷却,以防止核酸复性。电泳上样:将处理后的样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景3×甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于RNA样品的变性电泳,适用于甲醛变性或非变性的琼脂糖凝胶电泳以及聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可用于寡聚单链DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
如果凝胶中预先加入 EB,电泳结束后紫外灯下观察时200 bp 以下条带亮度较弱,可通过凝胶后染方法
2×miRNA去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专为miRNA电泳设计的试剂,能够有效变性核酸并提供清晰的电泳示踪效果,广泛应用于miRNA的分析和检测。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:去离子甲酰胺(Formamide):高浓度的甲酰胺能够有效变性核酸,消除其二级结构,确保miRNA在电泳过程中保持单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,帮助观察电泳的进程。EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸降解。使用方法样品混合:将miRNA样品与2×去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液按1:1比例混合。变性处理:混合后的样品在70℃加热5-10分钟,然后立即置于冰上冷却。电泳上样:将处理后的样品加入尿素-PAGE胶或甲醛变性琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×miRNA去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于miRNA的变性电泳,适用于尿素-PAGE胶和甲醛变性琼脂糖凝胶电泳。它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。
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