掷抱酵母-普通红色杆菌SHMCCD71865=CIP108956=KMM3465-托木尔假单胞菌CGMCC1.1365=JCM14085
总之,M-CSF(大鼠)作为一种重要的细胞因子,在免疫学和血液学研究中发挥着不可或缺的作用。
Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯
若两个LoxP位点方向相同,Cre重组酶可切除它们之间的DNA片段。
大肠杆菌DNA连接酶(E. coli DNA Ligase)是一种在分子生物学中广泛应用的酶,最初于1967年在大肠杆菌中被发现。它能够催化DNA链的5'-磷酸和3'-羟基末端形成磷酸二酯键,从而连接相邻的DNA片段。 工作原理 大肠杆菌DNA连接酶通过NAD⁺作为辅酶,提供能量来完成连接反应。它主要作用于具有黏性末端的DNA片段,但连接平末端的效率较低。该酶在DNA复制、修复和重组过程中发挥重要作用,特别是在DNA聚合酶Ⅰ填满单链缺口后,封闭DNA双链上的缺口。 应用 大肠杆菌DNA连接酶广泛应用于分子克隆和基因工程中。它常用于连接由限制性内切酶切割产生的黏性末端DNA片段,是构建重组DNA分子的关键步骤。此外,它还被用于cDNA克隆等特定应用中。 优势与特点 专一性:大肠杆菌DNA连接酶主要作用于黏性末端,连接效率高。 依赖NAD⁺:与T4 DNA连接酶不同,它需要NAD⁺作为辅酶,而不是ATP。 热失活:该酶可以通过65℃加热20分钟失活,便于后续实验操作。 大肠杆菌DNA连接酶凭借其高效性和专一性,已成为分子生物学实验中的重要工具,尤其在需要高特异性的连接反应中表现出色。
耐热核糖核酸酶H能够在高温下高效地完成这一任务,避免了RNA模板在高温条件下的降解问题。
MBP Ac(1-11) 是髓鞘碱性蛋白(Myelin Basic Protein, MBP)的乙酰化片段,包含MBP的前11个氨基酸。MBP是中枢神经系统髓鞘的主要成分之一,对于髓鞘的形成和维持具有重要作用。MBP Ac(1-11) 片段因其在神经生物学研究中的重要性而备受关注。 MBP Ac(1-11) 的结构与功能 MBP Ac(1-11) 的氨基酸序列为“Glu-Glu-Glu-Glu-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys”,这一序列富含谷氨酸和赖氨酸,赋予了该片段独特的电荷特性和生物活性。在天然MBP中,赖氨酸残基的乙酰化修饰对于调节其功能至关重要。MBP Ac(1-11) 通过模拟这种修饰状态,帮助研究者更好地理解MBP在髓鞘中的作用机制。 MBP的主要功能是维持髓鞘的结构完整性,促进神经冲动的快速传导。MBP Ac(1-11) 作为MBP的一个关键片段,能够与髓鞘中的其他蛋白质相互作用,调节髓鞘的组装和稳定性。此外,MBP Ac(1-11) 还在神经再生和修复过程中发挥重要作用,尤其是在多发性硬化症(MS)等神经退行性疾病中。
它在调节觉醒状态和行为方面的作用,也为研究睡眠障碍和认知功能障碍等疾病提供了新的方向。
PBCV-1 DNA连接酶(也称为SplintR连接酶或Chorella病毒DNA连接酶)是一种ATP依赖的DNA连接酶,能够高效催化与互补RNA单链配对的两条相邻DNA单链的连接反应。这种酶在连接过程中需要一条互补的RNA链作为“夹板”或“支架”,以固定两条DNA单链,从而实现高效的连接。 工作原理 PBCV-1 DNA连接酶的连接反应依赖于ATP作为能量来源,并且对RNA“夹板”固定的DNA底物具有极高的亲和力(表观Km值为1 nM),这使得它能够在复杂混合物中检测到亚纳摩尔级别的特定RNA。该酶对连接点处的碱基对组合具有一定的耐受性,但某些碱基对组合(如dCG/R或dG/C)可能会抑制酶活性。 应用优势 PBCV-1 DNA连接酶的连接活性远优于传统的T4 DNA连接酶,尤其在高灵敏度RNA检测方面表现出色。它被广泛应用于以下领域: 高灵敏度RNA检测:可用于检测miRNA、mRNA和非编码RNA的定性或定量分析,以及单核苷酸多态性(SNP)和可变剪接的检测。 原位测序:通过连接挂锁探针形成环状模板,用于原位滚环扩增(RCA),从而实现高通量检测。
在脂肪代谢方面,IGF-I (N-Met) 可以调节脂肪细胞的合成和分解,有助于维持体重和体脂分布的
在生物医学研究中,白细胞介素-1β(IL-1β)是一种关键的促炎细胞因子,广泛参与免疫反应和炎症过程。小鼠作为一种重要的实验动物模型,其免疫系统与人类高度相似,能够模拟多种人类疾病。因此,小鼠IL-1β的研究对于理解人类炎症和免疫反应具有重要意义。 IL-1β的生物学功能 IL-1β主要由巨噬细胞、树突状细胞和内皮细胞等产生,是炎症反应的主要启动因子之一。它通过与细胞表面的IL-1受体结合,激活多种信号通路,如NF-κB和MAPK通路,从而诱导多种炎症相关基因的表达。这些基因编码的蛋白能够促进炎症细胞的招募、激活和增殖,增强炎症反应。此外,IL-1β还能刺激其他细胞因子的释放,进一步放大炎症信号。 小鼠模型中的应用 小鼠模型在免疫学研究中具有重要价值,其免疫系统与人类高度相似,能够模拟多种人类疾病。在小鼠模型中,IL-1β的研究为理解人类免疫反应提供了重要线索: 炎症研究:通过在小鼠模型中注射重组IL-1β,可以诱导炎症反应,研究炎症的发病机制和进展。这种模型常用于研究类风湿性关节炎、炎症性肠病等炎症性疾病。
在病毒感染过程中,CEF14的表达水平通常会上调,以帮助宿主抵抗病毒的入侵。
T4 RNA连接酶2截短型(突变型)是一种经过基因工程改造的酶,通过引入特定的氨基酸突变(如R55K和K227Q),在保持高效连接活性的同时,显著降低了RNA的非特异性连接问题。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'羟基末端,无需ATP参与反应。 特点 高效连接活性:能够高效连接预腺苷化的单链DNA或RNA。 低背景连接:突变型酶减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。 无核酸酶污染:经过严格测试,确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。 热稳定性高:某些突变体在较高温度(如45℃和50℃)下仍保持较高的连接活性。 应用 T4 RNA连接酶2截短型(突变型)广泛应用于以下领域: 小RNA文库构建:用于二代测序(NGS)中的miRNA文库构建。 cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上。 链特异性cDNA文库构建:用于合成链特异性的cDNA文库。 使用方法 反应条件:在1×反应缓冲液中,25℃温育。 灭活条件:65℃加热20分钟。
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